U87MG细胞作为人胶质母细胞瘤的经典细胞系，因增殖稳定、生物学特性明确，被广泛应用于神经肿瘤发病机制研究、药物筛选及基因功能验证等领域。其体外培养效果直接决定实验数据的可靠性，而培养基配方、血清浓度及培养环境参数的精准把控，是实现细胞高效增殖与表型稳定的核心前提。结合科研实践与行业标准，明确U87MG细胞的最适培养条件，对提升神经肿瘤研究效率具有重要意义。

　　基础培养基的科学选择与配方优化，是U87MG细胞培养的基础保障?；∨嘌狣MEM（高糖型，葡萄糖浓度4.5g/L），其含有的氨基酸、维生素及无机盐成分，能精准匹配U87MG细胞的高代谢需求——相较于低糖DMEM，高糖配方可使细胞增殖速率提升20%-30%，同时维持细胞的肿瘤干细胞样特性。为进一步优化培养效果，需在基础培养基中添加关键补充成分：青霉素-链霉素混合液（终浓度100U/mL青霉素+100μg/mL链霉素）用于预防微生物污染；L-谷氨酰胺（终浓度2mmol/L）为细胞提供氮源，避免因谷氨酰胺分解导致的培养基pH值波动。

　　血清浓度的精准调控，是平衡U87MG细胞增殖与表型稳定的关键。胎牛血清（FBS）因含丰富的生长因子与黏附因子，是U87MG细胞培养的血清类型，最适终浓度为10%。浓度过低（如5%）会导致细胞贴壁能力下降、增殖停滞，细胞形态出现梭形化改变；浓度过高（如15%）则会增加细胞代谢负担，可能诱导细胞过度增殖引发接触抑制，同时提高实验成本。为确保血清质量稳定，建议选择经过γ射线照射的批次，降低支原体污染风险，且血清需在-20℃分装保存，避免反复冻融破坏活性成分。
 

　　培养环境参数的严格控制，为U87MG细胞提供模拟体内的生理微环境。温度需恒定维持在37℃，这是细胞内酶促反应的最适温度，温度波动超过±0.5℃会导致细胞周期紊乱——低温（如35℃）使细胞停滞于G1期，高温（如39℃）则可能引发细胞凋亡。CO?浓度需精准控制在5%，其核心作用是调节培养基的pH值稳定在7.2-7.4范围内，这一pH区间是U87MG细胞贴壁与增殖的最佳条件；若CO?浓度降至3%，培养基pH值会升至7.6以上，导致细胞脱壁死亡；浓度升至7%则会使pH值低于7.0，抑制细胞代谢活性。此外，培养箱内相对湿度需保持在95%以上，防止培养基蒸发导致的营养成分浓缩与渗透压升高。

　　除核心条件外，培养操作细节对U87MG细胞状态至关重要。细胞接种密度需控制在2×10³-5×10³cells/cm²，当细胞融合度达到70%-80%时进行传代，避免过度融合导致细胞分化；传代时采用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液消化，消化时间控制在1-2分钟，镜下观察到细胞变圆、间隙增大时立即终止消化，防止胰蛋白酶过度作用损伤细胞表面受体。在药物筛选等特殊实验中，可采用无血清培养基同步化细胞周期，或使用Matrigel基质胶构建三维培养模型，更贴近体内肿瘤微环境。

　　U87MG细胞的体外培养是“精准调控+细节把控”的系统工程。从高糖DMEM培养基的基础支撑，到10%胎牛血清的营养供给，再到37℃、5%CO?的环境保障，每一项条件的设定都围绕细胞的生理特性展开。通过严格遵循最适培养条件，配合标准化的操作流程，可实现U87MG细胞的稳定传代与高效增殖，为神经肿瘤研究提供高质量的细胞模型，助力科研成果的精准产出。